云克隆高活力蛋白酶K為核酸檢測保駕護(hù)航
新冠病毒大爆發(fā),核酸檢測試劑盒供不應(yīng)求,對于樣本前處理的重要試劑蛋白酶K(Proteinase K, PROK)的需求節(jié)節(jié)攀升,市場上對高活力Proteinase K的需求也更加迫切。
Proteinase K是一種從白色念珠菌分離出來的強(qiáng)力蛋白溶解酶,是一種絲氨酸蛋白酶,其酶活具有廣泛的特異性,在天然狀態(tài)下也能降解許多蛋白質(zhì),主要裂解脂肪族和芳香族氨基酸羧基附近的含有封閉α-氨基的肽鍵,具有較廣的PH(4-12.5)及耐高溫性(50-70°C)。
檢測原理:
福林-酚試劑法:以變性血紅蛋白為底物,測定在37°C、PH7.5的條件下酶解產(chǎn)生的酪氨酸。
1U Proteinase K的活性定義:
一單位在37°C、pH 7.5條件下每分鐘可水解尿素變性血紅蛋白而產(chǎn)生相當(dāng)于1.0μmole (181 μg)的酪氨酸顯色(福林酚試劑顯色)。
活性檢測:
酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:以不同濃度的酪氨酸作為橫坐標(biāo),對應(yīng)的吸光度值為縱坐標(biāo)(O.D.)(在波長755nm下讀數(shù)),繪制校準(zhǔn)曲線,如下:
根據(jù)上述的標(biāo)準(zhǔn)曲線,比較本公司與其他公司Proteinase K在相同實(shí)驗(yàn)條件下的活力:
純度檢測:
通過SDS-PAGE電泳實(shí)驗(yàn),顯示本公司Proteinase K(Product No.: APX263Ge51)的純度在90%以上,如下圖:
以上結(jié)果顯示:云克隆Proteinase K經(jīng)過一系列驗(yàn)證,顯示其純度高,活性顯著高于市面上其他產(chǎn)品。