肥胖抑制素(OB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
ELISA Kit for Obestatin (OB)
產(chǎn)品包裝(模擬)
產(chǎn)品包裝(模擬)
實驗結(jié)果圖
標準曲線圖
通過ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認證
特異性
本試劑盒用于檢測肥胖抑制素(OB)，經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關或相似物質(zhì)交叉反應檢測，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的肥胖抑制素(OB)（加標樣品），重復測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
| serum(n=5) | 83-98 | 88 |
| EDTA plasma(n=5) | 88-101 | 96 |
| heparin plasma(n=5) | 95-105 | 101 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差： CV<10%
批間差： CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的肥胖抑制素(OB)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中肥胖抑制素(OB)含量的測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| serum(n=5) | 98-105% | 93-105% | 81-90% | 80-91% |
| EDTA plasma(n=5) | 87-96% | 96-104% | 87-105% | 88-104% |
| heparin plasma(n=5) | 80-92% | 81-91% | 91-99% | 84-104% |
穩(wěn)定性
經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
實驗原理
將肥胖抑制素(OB)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的肥胖抑制素(OB)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物素化的肥胖抑制素(OB)抗體，將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標記的親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肥胖抑制素(OB)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值)，計算樣品濃度。
相關產(chǎn)品
| 編號 | 適用物種：Homo sapiens (Human，人) | 應用(僅供研究使用，不用于臨床診斷！) |
| CPC039Hu21 | 肥胖抑制素(OB)卵白蛋白偶聯(lián)物 | Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
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參考文獻
| 雜志 | 參考文獻 |
| Journal of Obesity and Metabolic Research | Evaluation of effects of diet on serum obestatin levels in over-weight patients with polycystic ovary syndrome[Org:Source] |
| Turk J Gastroenterol | Significance of appetite hormone ghrelin and obestatin levels in the assessment of the severity of acute pancreatitis[Pubmed:25141321] |
| Acta Paediatrica | Serum complement factor 5a levels are associated with nonalcoholic fatty liver disease in obese children[DOI:?10.1111/apa.14106] |
| BMC Endocrine Disorders | The role of the adipocytokines vaspin and visfatin in vascular endothelial function and insulin resistance in obese children[Pubmed: 31771561] |
